Isticmaalka iyo taxaddarrada tuubada centrifuge ultrafiltration
1) Dooro tuubo ultrafiltration ku habboon.Ogow in xuubabka UF ay ku kala duwan yihiin heerka dulqaadka ay u leeyihiin kiimikooyinka kala duwan.Caadi ahaan, tuubooyinka ultrafiltration ee leh goynta 10 kDa ee culeyska unugyada waxaa lagu dooran karaa gooyn miisaan kelli ah oo aan ka badnayn 1/3 ee miisaanka molecular ee borotiinka xiisaha, sida 35 kDa.Haddii culeyska molecular ee borotiinka xiisaha uu ku dhow yahay 10 kd, tuubo ultrafiltration ah oo miisaankeedu yahay 3 KD ayaa la isticmaali karaa.
(2) Qalabka ultrafiltration, ee dhawaan la soo iibsaday, waa qalalan, oo leh biyo ultrapure ah oo lagu daray ka hor isticmaalka ka hor iyo biyaha si buuxda u dhex maray xuubabka, qubeyska barafka ama qaboojiyaha horay loo qaboojiyey dhowr daqiiqo.Biyaha ayaa markaa lagu shubaa, ie dareeraha borotiinka, iyo inta lagu daray, mid kasta oo aan ka badnayn xariiqda cad ee sare ee tuubada.Qalliinku waa iftiin, tuubada ultrafiltration waxay u baahan tahay in lagu sii qaboojiyo baraf ka hor inta aan lagu darin xalka borotiinka.
3) Baaxadda iyo xudunta cufisjiidkuba waxay ahayd in la gaadho dheellitirnaanta.Ogow xawaaraha wareegtada iyo dardargelintu maaha mid aad u degdeg badan, haddii kale waxay dhaawacaysaa xuubka ultrafiltration.ultrafiltration centrifugal ayaa la bilaabay (centrifuge horay loo qaboojiyey ilaa 4 darajo).Ka dib markii RPM ee centrifuges kala duwan loo beddelay g, way ka duwan tahay.Dardargelinta centrifuge ayaa lagu hagaajiyay ugu yaraan, hoos u dhigista cadaadiska xuubka.Ogow, hubso inaad ka tagto centrifuge ka dib markii sentrifugedu gaadho xawliga loo socdo, ama haddii ay dhibaato kaa haysato, ma xamili kartid markii ugu horeysay.Jihaynta xuubka ee dunta dunta ayaa la hagaajiyay si waafaqsan tilmaamaha (kiis centrifuge xagal ah waa xuub ilaa dhidib toosan).Isticmaalka dhabta ah, xawaaraha wareega guud wuxuu ka hooseeyaa kan tilmaamaha, si nolosha tuubada centrifuge loo kordhiyo.
3) Baaxadda iyo xudunta cufisjiidkuba waxay ahayd in la gaadho dheellitirnaanta.Ogow xawaaraha wareegtada iyo dardargelintu maaha mid aad u degdeg badan, haddii kale waxay dhaawacaysaa xuubka ultrafiltration.ultrafiltration centrifugal ayaa la bilaabay (centrifuge horay loo qaboojiyey ilaa 4 darajo).Ka dib markii RPM ee centrifuges kala duwan loo beddelay g, way ka duwan tahay.Dardargelinta centrifuge ayaa lagu hagaajiyay ugu yaraan, hoos u dhigista cadaadiska xuubka.Ogow, hubso inaad ka tagto centrifuge ka dib markii sentrifugedu gaadho xawliga loo socdo, ama haddii ay dhibaato kaa haysato, ma xamili kartid markii ugu horeysay.Jihaynta xuubka ee dunta dunta ayaa la hagaajiyay si waafaqsan hab-raacaIsticmaalka dhabta ah, xawaaraha wareega guud wuxuu ka hooseeyaa kan tilmaamaha, si nolosha tuubada centrifuge loo kordhiyo.
(4) Markaad xoogga saarto 1ml ee soo haray, qaado 50ul ee xalinta xayndaabka, ku dar 10ul qulqulka oo arag haddii uu jiro midab buluug ah, sida xukunka haddii tuubada ultrafiltration ay ka maqan tahay borotiinka.Haddii tuubbadu soo daadato, ku shub lakabka sare oo ku shub tuubo cusub si aad u bilowdo ultrafiltration.Si loo go'aamiyo si sax ah haddii tuubooyinka la seegay, u qabooji 10min oo leh 5mgml ee BSA kahor qulqulka, ku ordaya xabagta borotiinka, ama baaritaanka cayriin ee Bradford, oo sii wad adoo ku daraya xalka borotiinka uruursan ee haray (kaas oo ku shaqeeya barafka kana ilaaliya borotiinnada kuleylka) ilaa dhammaan xoogga saarista ayaa lagu daray.Ka taxadar inta lagu jiro centrifugation haddii roobabka borotiinada ay dhacaan, taasoo horseedaysa xiritaanka tuubada.Haddii roobabku dhacaan, go'aami in sababta gaarka ah ee roobabku ay tahay diiradda borotiinka xad-dhaafka ah ama kayd aan habboonayn;Midka hore waxaa lagu xallin karaa ultrafiltration of tubes ultrafiltration oo badan isku mar, hoos u dhigista xoogga, iyo kan dambe iyadoo la isweydaarsanayo xalal kala duwan oo kayd ah ilaa roobka borotiinka uusan dhicin.
(4) Markaad xoogga saarto 1ml ee soo haray, qaado 50ul ee xalinta xayndaabka, ku dar 10ul qulqulka oo arag haddii uu jiro midab buluug ah, sida xukunka haddii tuubada ultrafiltration ay ka maqan tahay borotiinka.Haddii tuubbadu soo daadato, ku shub lakabka sare oo ku shub tuubo cusub si aad u bilowdo ultrafiltration.Si loo go'aamiyo si sax ah haddii tuubooyinka la seegay, u qabooji 10min oo leh 5mgml ee BSA kahor qulqulka, ku ordaya xabagta borotiinka, ama baaritaanka cayriin ee Bradford, oo sii wad adoo ku daraya xalka borotiinka uruursan ee haray (kaas oo ku shaqeeya barafka kana ilaaliya borotiinnada kuleylka) ilaa dhammaan xoogga saarista ayaa lagu daray.Ka taxadar inta lagu jiro centrifugation haddii roobabka borotiinada ay dhacaan, taasoo horseedaysa xiritaanka tuubada.Haddii roobabku dhacaan, go'aami in sababta gaarka ah ee roobabku ay tahay diiradda borotiinka xad-dhaafka ah ama kayd aan habboonayn;Midka hore waxaa lagu xallin karaa ultrafiltration of tubes ultrafiltration oo badan isku mar, hoos u dhigista xoogga, iyo kan dambe iyadoo la isweydaarsanayo xalal kala duwan oo kayd ah ilaa roobka borotiinka uusan dhicin.
(5) Tallaabooyinka ugu horreeya waxaa loo isticmaalaa in lagu ururiyo borotiinka, iyo haddii kaydiyaha la beddelayo, si tartiib ah ugu dar bakhaar cusub (ultrafiltration iyada oo loo marayo 0.22um xuubka ultrafiltration) ilaa 1ml oo wadarta borotiinka, oo dib u fiirso ilaa 1ml saddexdii. waqtiyo isku xigta, oo leh mugga ugu dambeeya ee xoogga saaraya iyadoo ku xiran diiradda borotiinka la doonayo, guud ahaan aan ka badneyn 500ul, laakiin sidoo kale gudaha 200ul.Gaadhi 1000 × ama ka badan saddex jeer, asal ahaan inta beddelka kaydka ah, sida lagu xisaabiyo ugu yaraan 10 × ama wax ka badan kobcinta mugga mar kasta.
(5) Tallaabooyinka ugu horreeya waxaa loo isticmaalaa in lagu ururiyo borotiinka, iyo haddii kaydiyaha la beddelayo, si tartiib ah ugu dar bakhaar cusub (ultrafiltration iyada oo loo marayo 0.22um xuubka ultrafiltration) ilaa 1ml oo wadarta borotiinka, oo dib u fiirso ilaa 1ml saddexdii. waqtiyo isku xigta, oo leh mugga ugu dambeeya ee xoogga saaraya iyadoo ku xiran diiradda borotiinka la doonayo, guud ahaan aan ka badneyn 500ul, laakiin sidoo kale gudaha 200ul.Gaadhi 1000 × ama ka badan saddex jeer, asal ahaan inta beddelka kaydka ah, sida lagu xisaabiyo ugu yaraan 10 × ama wax ka badan kobcinta mugga mar kasta.
Waqtiga boostada: Nov-09-2022